- 更新時間2016-09-09
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上海分光光度計絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定分光光度分析就是根據(jù)物質的吸 收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量， 相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構，上海分光光度計吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其 *的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或 測 定該物質的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
上海分光光度計物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該物質的物理常數(shù)。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區(qū)，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或對照品同時操作。
上海分光光度計在食品生產中為了保證有顏色的飲料(如可樂、果汁及茶飲料)產品的顏色一致，可以在可見光區(qū)用紫外可見上海分光光度計來測定其吸光度值，使色差符合產品要求。上海分光光度計在發(fā)酵業(yè)中也可通過測定吸光度值來確定產品的發(fā)酵完成程度。對于一些成分比較單一的產品也可通過測定吸光度值來確定產品合格與否。比如，判定營養(yǎng)增強劑維生素Bl的質量就可以在400 nm下測定其吸光度值，當其值不超過0．020時，即可確定為合格品。
事實上，上海分光光度計的設計原理和工作原理，允許吸光值在一定范圍內變化，即儀器有一定的準確度和度。如Eppendorf Biophotometer的準確度≤1.0%（1A）。這樣多次測試的結果在均值1.0%左右之間變動，都是正常的。另外，還需考慮核酸本身物化性質和溶解核酸的緩沖液的pH值，離子濃度等：在測試時，離子濃度太高，也會導致讀數(shù)漂移，因此建議使用pH值一定、離子濃度較低的緩沖液，如TE，可大大穩(wěn)定上海分光光度計讀數(shù)。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素：由于樣品中不可避免存在一些細小的顆粒，尤其是核酸樣品。
